| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 366-1 | ||||
Resumo:A Salmonella enterica subsp. enterica Sorovar Typhimurium (ATCC 14028) é um bastonete gram-negativo, anaeróbio facultativo que não forma endósporos e um dos principais agentes envolvidos em surtos de origem alimentar em países desenvolvidos. Este estudo teve como objetivo predizer o nível de contaminação da água pela cepa ATCC 14028 de Salmonella trazendo a possibilidade de otimização da determinação de microrganismos contaminantes por meio de um método rápido como a Espectroscopia de Impedância Elétrica (EIS). A técnica de EIS é utilizada para fins de caracterização de propriedades elétricas de diversos materiais. A partir dos espectros, é possível obter informações sobre a natureza da amostra, avaliando parâmetros como condutividade, mobilidade das cargas, coeficiente de difusão, capacitância, entre outras.
Como técnica padrão foi realizada a contagem de células viáveis da cepa Salmonella Typhimurium ATCC 14028 em amostras de água de abastecimento do município de Governador Valadares – MG, contaminadas experimentalmente. Inicialmente, a água de abastecimento coletada da torneira do laboratório de alimentos da UFJFGV foi esterilizada em autoclave por 121ºC a 15 minutos. A cepa padrão foi cultivada em caldo Mueller Hinton por 24 h a temperatura de 37°C até obtenção de 109 UFC/mL. Após, as águas da torneira previamente esterilizadas foram contaminadas com a cepa padrão, e realizadas diluições seriadas. O meio de cultivo utilizado foi o ágar SS e a inoculação realizada em duplicata por plaqueamento em superfície. As placas foram incubadas a 37 ºC por 24 h, após o período de incubação, foi realizada a contagem das colônias. As medidas de impedância elétrica foram realizadas na água contaminada experimentalmente logo após a realização da diluição seriada até 10-6 em um analisador HIOKI, modelo 3170, estimulado por um campo elétrico externo alternado, do tipo onda senoidal (AC), com 1 V pico a pico, em uma faixa de frequência de 10 Hz a 5 MHz. Um eletrodo de placa paralela de platina (constante geométrica K = 1 cm-1) foi acoplado ao instrumento para medições nas águas. As grandezas medidas foram: módulos de impedância e admitância, e partes real e imaginária da impedância. Os espectros foram gerados a partir do Software de Análise de Dados e Gráficos OriginPro 9.0.0 (64 bits) SR2 b87.
O resultado da contagem padrão em placas na diluição 10-6 foi 9,9x108 UFC/mL, permitindo a confirmação da contaminação experimental realizada. A análise dos dados obtidos para a contagem padrão em placas, mostraram correspondência com a tendência dos espectros obtidos pela técnica de EIS. Observou-se que os espectros do módulo da impedância elétrica, assim como de grandezas derivadas como a parte real (Re[Z*], imaginária (Im[Z*] e a admitância apresentaram tendências de variação do valor de seus platôs, coerentes com as concentrações de microrganismos presentes, controladas pelas diluições realizadas.
Os microrganismos transmitidos pela água têm como principal rota de contaminação a fecal-oral, assim, o controle da qualidade da água a ser consumida pela população é uma atividade de extrema importância. Desta forma, a expectativa é que a EIS possa vir a ser utilizada como uma metodologia alternativa, mais prática e rápida que as tradicionalmente utilizadas, porém estudos mais aprofundados são necessários para melhor definição dos parâmetros de análise.
Palavras-chave: Salmonella Typhimurium, Espectroscopia de Impedância Elétrica, contaminação da água, contagem de colônias | |||||